الصيدلاني راتب
26-02-2013, 12:07 PM
الكشف عن النيكوتين :
1 – النيكوتين الخام : عبارة عن سائل لزج لا لون له أو قد يميل الى اللون البني ( نتيجة تعرضه للضوء أو الهواء ) ، متطاير ( volatile ) ، يعشق الماء ( hygroscopic ) ، ذوّاب في الماء ويختلط بالايثانول .
- مظهر المحلول ( appearance of solution ) : عند اذابة (1) غم من مادة النيكوتين المعيارية في ( 10 ) مل ماء ، فان المحلول يبدو شفافا مقارنة مع محلول عياري .
- معامل الدوران النوعي للضوء الناتج عن النيكوتين ( specific optical rotation ) : عند اذابة (1) غم من النيكوتين في ( 50 ) مل ايثانول فان قيمة معامل انكسار الضوء تكون بين ( -140 to –152 )
- الاختبار اللوني : عن طريق محلول يحتوي على العامل اللوني ( cyanogen bromide ) وذلك بإضافة نقطة واحدة على العينة التي يتوقع أن تحتوي على النيكوتين ، والنتيجة هي ظهور اللون البرتقالي في حالة وجود النيكوتين . هذا الاختبار يستعمل أيضا للكشف عن باقي المركبات التي تحتوي في تركيبتها الكيميائية على حلقة بايريدين ( pyridine ring ) على النحو التالي :
يكون هذا الاختبار مفيدا اذا لم تكن حلقة بايريدين مرتبطة مباشرة بحلقة أخرى ، وأن لا يكون أكثر من موقع من مواقعها مرتبط به مجموعات كيميائية ، وأن لا تكون ذرة النيتروجين مرتبطة مع أي مجموعة كيميائية . ولذلك فان هذا الاختبار يفيد فقط في الكشف عن حلقة بايريدين أحادية الارتباط مع غيرها ،كما هو الحال في النيكوتين ، وكلما زاد وجود ارتباط كيميائي في هذه الحلقة فان الاستجابة لهذا الاختبار تضعف كثيرا ، وكذلك اللون الناتج قد يتغير ويعطي لونا زهريا كما في مركب ( azatadine ) أو لون برتقالي زهري ( orange – pink ) كما في مركب ( carbinoxamine ) ، أو زهري بنفسجي كما في مركب ( tropicamide ) .
- طريقة المعايرة في وسط لامائي ( non-aqueous titration ) : في حال النيكوتين الخام أو استخلاص النيكوتين بمذيب عضوي من عينة تأكد من وجوده فيها ، وفي هذه الحالة يمكن تعيين كمية النيكوتين في العينة ، وذلك باستخدام حمض ( perchloric acid , 0.1 M ) وكاشف مناسب لغاية انتهاء التفاعل والوصول الى نقطة التعادل ، وحساب كمية النيكوتين اعتمادا على التجربة المعيارية ( كل (1) مل من حمض (( perchloric acid , 0.1M يعادل ( 8.11 ) ملغم من مادة النيكوتين) .
- استخدام جهاز الطيف الضوئي ( spectrophotometry ): عند اذابة النيكوتين الخام ( أو بعد استخلاصه ) في وسط حمضي ( 0.1 M HCL ) واجراء مسح ضوئي في منطقة الضوء فوق البنفسجي ( ultraviolet spectrum ) نجد أن أقصى طول موجة امتصاص لمادة النيكوتين تكون عند ( 259 nm ) ، واذا ما استخدمنا وسط قاعدي ( 0.1 M NaOH ) فتكون أقصى طول موجة امتصاص عند ( 261 nm ) .
وعند التحليل الكمي نلجأ الى تطبيق قانون بير- لامبرت ( Beer’s – Lambert law ) والذي ينص على ما يلي :
A = a . b . c
حيث Aكمية الضوء الممتص من قبل المركب الكيميائي
a : ثابت الامتصاص عند ثبوت طول الموجة والوسط المستخدم
b : طول مسار الضوء في العينة الموجودة في خلية القياس
c : تركيز المادة ( ملغم / مل ) .
وهذه العلاقة تربط كمية الضوء الممتص بكمية المادة الماصة للضوء .
- استخدام طريقة التحليل المناعي ( Immunoassay ) : وهذه الطريقة تعتمد على مبدأ تفاعلات المواد الغريبة antigens - - ( مثل الأدوية ) ، مع الأجسام المضادة antibodies- لتلك المواد الغريبة .
يتم الكشف بواسطة هذه الطريقة عن استخدام النيكوتين عن طريق مستقلب النيكوتين وهو مادة الكوتينين ( cotinine ) في البول لأن فترة بقاء هذا المستقلب طويلة في الجسم حيث أن معدل فترة نصف العمر لها هو ( 19 ) ساعة مقارنة بالنيكوتين ( 0.5 – 2 ) ساعة ، ولذلك فان الكشف عن الكوتينين لا يرتبط كثيرا بزمن أخذ العينة من الشخص مقارنة بالنيكوتين وباقي مخلفاته ( مستقلباته ) .
هناك أجهزة خاصة معدّة لهذا الفحص ( شبيهة تماما بشكل جهاز فحص الحمل المنزلي ) وتقيس لغاية تراكيز متدنية تصل الى ( 200 ng / ml ) .اضافة الى وجود أجهزة أخرى تعتمد على التفاعلات المناعية للكشف عن المورفين والأمفيتامينات والباربيتيورات و ل.س.د. وأدوية أخرى .
اضافة لاستخدام أجهزة الفصل الحديثة مثل ( HPLC )، وغيرها كثير .
1 – النيكوتين الخام : عبارة عن سائل لزج لا لون له أو قد يميل الى اللون البني ( نتيجة تعرضه للضوء أو الهواء ) ، متطاير ( volatile ) ، يعشق الماء ( hygroscopic ) ، ذوّاب في الماء ويختلط بالايثانول .
- مظهر المحلول ( appearance of solution ) : عند اذابة (1) غم من مادة النيكوتين المعيارية في ( 10 ) مل ماء ، فان المحلول يبدو شفافا مقارنة مع محلول عياري .
- معامل الدوران النوعي للضوء الناتج عن النيكوتين ( specific optical rotation ) : عند اذابة (1) غم من النيكوتين في ( 50 ) مل ايثانول فان قيمة معامل انكسار الضوء تكون بين ( -140 to –152 )
- الاختبار اللوني : عن طريق محلول يحتوي على العامل اللوني ( cyanogen bromide ) وذلك بإضافة نقطة واحدة على العينة التي يتوقع أن تحتوي على النيكوتين ، والنتيجة هي ظهور اللون البرتقالي في حالة وجود النيكوتين . هذا الاختبار يستعمل أيضا للكشف عن باقي المركبات التي تحتوي في تركيبتها الكيميائية على حلقة بايريدين ( pyridine ring ) على النحو التالي :
يكون هذا الاختبار مفيدا اذا لم تكن حلقة بايريدين مرتبطة مباشرة بحلقة أخرى ، وأن لا يكون أكثر من موقع من مواقعها مرتبط به مجموعات كيميائية ، وأن لا تكون ذرة النيتروجين مرتبطة مع أي مجموعة كيميائية . ولذلك فان هذا الاختبار يفيد فقط في الكشف عن حلقة بايريدين أحادية الارتباط مع غيرها ،كما هو الحال في النيكوتين ، وكلما زاد وجود ارتباط كيميائي في هذه الحلقة فان الاستجابة لهذا الاختبار تضعف كثيرا ، وكذلك اللون الناتج قد يتغير ويعطي لونا زهريا كما في مركب ( azatadine ) أو لون برتقالي زهري ( orange – pink ) كما في مركب ( carbinoxamine ) ، أو زهري بنفسجي كما في مركب ( tropicamide ) .
- طريقة المعايرة في وسط لامائي ( non-aqueous titration ) : في حال النيكوتين الخام أو استخلاص النيكوتين بمذيب عضوي من عينة تأكد من وجوده فيها ، وفي هذه الحالة يمكن تعيين كمية النيكوتين في العينة ، وذلك باستخدام حمض ( perchloric acid , 0.1 M ) وكاشف مناسب لغاية انتهاء التفاعل والوصول الى نقطة التعادل ، وحساب كمية النيكوتين اعتمادا على التجربة المعيارية ( كل (1) مل من حمض (( perchloric acid , 0.1M يعادل ( 8.11 ) ملغم من مادة النيكوتين) .
- استخدام جهاز الطيف الضوئي ( spectrophotometry ): عند اذابة النيكوتين الخام ( أو بعد استخلاصه ) في وسط حمضي ( 0.1 M HCL ) واجراء مسح ضوئي في منطقة الضوء فوق البنفسجي ( ultraviolet spectrum ) نجد أن أقصى طول موجة امتصاص لمادة النيكوتين تكون عند ( 259 nm ) ، واذا ما استخدمنا وسط قاعدي ( 0.1 M NaOH ) فتكون أقصى طول موجة امتصاص عند ( 261 nm ) .
وعند التحليل الكمي نلجأ الى تطبيق قانون بير- لامبرت ( Beer’s – Lambert law ) والذي ينص على ما يلي :
A = a . b . c
حيث Aكمية الضوء الممتص من قبل المركب الكيميائي
a : ثابت الامتصاص عند ثبوت طول الموجة والوسط المستخدم
b : طول مسار الضوء في العينة الموجودة في خلية القياس
c : تركيز المادة ( ملغم / مل ) .
وهذه العلاقة تربط كمية الضوء الممتص بكمية المادة الماصة للضوء .
- استخدام طريقة التحليل المناعي ( Immunoassay ) : وهذه الطريقة تعتمد على مبدأ تفاعلات المواد الغريبة antigens - - ( مثل الأدوية ) ، مع الأجسام المضادة antibodies- لتلك المواد الغريبة .
يتم الكشف بواسطة هذه الطريقة عن استخدام النيكوتين عن طريق مستقلب النيكوتين وهو مادة الكوتينين ( cotinine ) في البول لأن فترة بقاء هذا المستقلب طويلة في الجسم حيث أن معدل فترة نصف العمر لها هو ( 19 ) ساعة مقارنة بالنيكوتين ( 0.5 – 2 ) ساعة ، ولذلك فان الكشف عن الكوتينين لا يرتبط كثيرا بزمن أخذ العينة من الشخص مقارنة بالنيكوتين وباقي مخلفاته ( مستقلباته ) .
هناك أجهزة خاصة معدّة لهذا الفحص ( شبيهة تماما بشكل جهاز فحص الحمل المنزلي ) وتقيس لغاية تراكيز متدنية تصل الى ( 200 ng / ml ) .اضافة الى وجود أجهزة أخرى تعتمد على التفاعلات المناعية للكشف عن المورفين والأمفيتامينات والباربيتيورات و ل.س.د. وأدوية أخرى .
اضافة لاستخدام أجهزة الفصل الحديثة مثل ( HPLC )، وغيرها كثير .